RELEVÂNCIA ETNOFARMACOLÓGICA: O extrato de proantocianidinas de semente de uva (GSPE), derivado de Vitis vinifera L., tem sido usado na medicina tradicional europeia e mediterrânea para tratar inflamações, doenças vasculares e feridas. Historicamente empregado para "desintoxicação" e "caroços duros" (possivelmente tumores), seus efeitos são agora atribuídos às propriedades antioxidantes e antiproliferativas do GSPE. Estudos modernos sugerem que esses mecanismos podem fundamentar suas potenciais aplicações anticâncer, incluindo contra o câncer de bexiga. OBJETIVO DO ESTUDO: Validar as alegações antitumorais tradicionais das sementes de uva, investigando a eficácia do extrato de proantocianidinas de semente de uva (GSPE) contra o câncer de bexiga (BCa) in vitro e in vivo, com foco em seus mecanismos de regulação metabólica. MÉTODOS: Empregamos uma abordagem multiômica integrada combinando ensaios in vitro (incluindo MTT, formação de colônias, migração e análises de ciclo celular/apoptose), modelos ortotópicos de BCa in vivo e metabolômica não direcionada usando cromatografia líquida de ultra-alta performance-espectrometria de massa Q Exactive™ (UHPLC-Q-Exactive MS). A análise bioinformática foi realizada para examinar a expressão da inosina 5'-monofosfato desidrogenase 1/2 (IMPDH1/2) em tecidos de BCa e avaliar sua significância prognóstica. Subsequentemente, os níveis de expressão de IMPDH1 e IMPDH2 foram quantificados por qPCR e Western blot, e sua atividade enzimática foi avaliada in vitro. O docking molecular foi então realizado para prever potenciais interações entre GSPE e IMPDH1/2. RESULTADOS: O GSPE exibiu potentes efeitos antitumorais dose-dependentes em células de BCa, suprimindo a proliferação, formação de colônias e migração através da indução de parada G0/G1 e morte celular apoptótica. Em modelos murinos ortotópicos de BCa, a administração de GSPE alcançou 82,66% de inibição do crescimento tumoral (p < 0,001) sem induzir toxicidade sistêmica ou irritação da bexiga, conforme confirmado por bioquímica sérica normal e análise histopatológica. O perfil metabolômico não direcionado identificou 307 metabólitos significativamente alterados, com o metabolismo de purina/pirimidina mostrando a desregulação mais profunda. A análise bioinformática revelou que a expressão elevada de IMPDH1/2 em tecidos de BCa correlacionou-se com um mau prognóstico para os pacientes. Mecanisticamente, o GSPE regulou negativamente a expressão de IMPDH1/2 de forma dose-dependente (em níveis de mRNA e proteína), inibiu diretamente sua atividade enzimática e ligou-se aos sítios ativos de IMPDH1/2 com alta afinidade. CONCLUSÃO: Nossos achados demonstram que o GSPE serve como um novo agente terapêutico direcionado a IMPDH1/2, capaz de interromper o metabolismo de nucleotídeos no BCa através da dupla inibição da função enzimática e da expressão gênica. Embora a(s) forma(s) ativa(s) exata(s) in vivo exijam investigação farmacocinética adicional, a potente eficácia antitumoral e o perfil de segurança excepcional do GSPE intravesical apoiam seu significativo potencial clínico como agente fitoterapêutico para o tratamento do BCa.